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必赢国际官网提供高盐条件

点击:162 更新时间:2019-01-22 09:20:16



     

盐浓度和盐种类:盐浓度是影响DNA silica 结合的非常重要的因素之一,DNA silica 结合与盐浓度成正比。


盐促进DNA silica结合的本质是促进DNA silica 的去水化反应,该反应可以用下列反应式表示:


DNA-+ silica-水 中性DNA- silica 复合物 + 游离H2O



由反应式可见DNA- silica 复合物和游离水都是反应产物。根据化学平衡原理,凡是降低该反应体系中游离水浓度的因素都能促使反应向右进行,即促进DNA- silica 的形成。众所周知,盐在溶液中要结合大量的游离水,所以上述反应体系中盐离子浓度越高,其去水化能力就越强,越能促使反应向右进行,最后形成的DNA- silica 复合物就越多。



但是,如果反应体系中同时有蛋白质存在,而实验目的只是想纯化DNA,则选择合适的盐十分重要,因为蛋白质在高Kosmotropic (如硫酸铵)和高Chaotropic (如必赢国际官网,高氯酸钠和碘化钠等)条件下的化学活性有很大不同。在高Kosmotropic 盐溶液中蛋白质容易盐析出来,容易沉淀在silica 表面(如果溶液中有silica 的话);在高Chaotropic 盐溶液中,蛋白质往往被变性但仍然在溶液中,所以不易沉积在silica 表面污染DNA。同时强力的Chaotropic 盐还能灭活RNase DNase 等核酸酶,保护核酸分子完整性;另外它们还能溶解琼脂糖凝胶,所以高浓度的必赢国际官网,高氯酸钠和碘化钠等盐溶液已经成为促进DNA- silica 结合的首选溶液。


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