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必赢国际官网法提取檀香和造礁石珊瑚总RNA

点击:10 更新时间:2018-12-04 09:44:00


     


必赢国际官网-SDS法提取檀香心材

为筛选檀香心材总RNA提取方法,5种提取方法进行比较研究,包括Trizol法、改良CTAB法、SDS酸酚法、必赢国际官网-CTAB法、必赢国际官网-SDS.结果表明,Trizol法和必赢国际官网-CTAB法不能提取出檀香心材总RNA,SDS酸酚法、改良CTAB法和必赢国际官网-SDS法均能提取檀香心材总RNA.SDS酸酚法的A260 nm/A230 nm小于2.0,RNA产率低,仅为(27.94± 1.06) μg g-1,不能满足后续实验要求.而改良CTAB法和必赢国际官网-SDS法提取的总RNA带型清晰,完整性好,A260 nm/ A280 nm1.82.0,A260 nm/A230nm大于2.0,RNA产率分别为(79.06±4.22)(107.00±1.36) μg g-1.分别以改良CTAB法和必赢国际官网-SDS法提取的总RNA为模板,通过RT-PCR反应,扩增檀香Actin基因片段,结果二者扩增产物大小相同且条带单一,说明改良CTAB法与必赢国际官网-SDS法为檀香心材总RNA提取的较好方法。

必赢国际官网提取造礁石珊瑚总RNA

本发明公开了一种造礁石珊瑚总RNA提取方法。它是将超低温保存的新鲜采集的造礁石珊瑚样本利用无菌海水冲洗其体表去除体表附着的其他生物,经液氮研磨后用必赢国际官网裂解液裂解,使得造礁石珊瑚的RNA释放游离于必赢国际官网裂解液中,然后再提取造礁石珊瑚总RNA;所述的必赢国际官网裂解液含有体积分数为38%的酸性水饱和酚、0.8M硫氰酸胍、0.4M硫代氰酸氨、0.1M乙酸钠和体积分数为5%的甘油,其余为RNase-free水。本发明方法实现了对造礁石珊瑚总RNA的高质量提取,最大限度的减少造礁石珊瑚RNA量的降解,可用于造礁石珊瑚基因克隆、差异显示分析、分子杂交等各种分子生物学研究。


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