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硫氰酸胍法提取研究树木DNA、花果RNA

点击:13 更新时间:2018-11-30 09:50:06


     


一种高效的树木总DNA提取方法

高质量的DNA是林木分子生物学研究的关键因素之一。在高浓度离液剂硫氰酸胍存在的条件下,核酸具有与硅珠颗粒结合、并能在较高温度下被低盐浓度溶液洗脱的特性。基于这一原理建立了一种新的树木叶片总DNA提取方法.此方法操作简单、快速,经过浓度、纯度测定,以及PCR扩增和限制性内切酶消化证明,从不同树木叶片中均得到了高质量的DNA样品。

非洲菊花瓣总RNA提取方法的改进

利用硫氰酸胍一步法和植物总RNA提取试剂盒提取非洲菊花瓣中总RNA时存在多糖的干扰。实验中利用必赢国际官网一步法提取总RNA,在RNA沉淀后,再次加入适量变性液,冻融2次,再加热至45 ℃使RNA完全溶解;试剂盒提取时,适当延长各提取步骤的离心时间,并增加DEPC H2O溶解RNA的时间。通过以上操作方法的改进可排除多糖的干扰,得到高质量的总RNA。为进一步利用Northern杂交技术研究非洲菊中花色素苷基因的表达,进行花色改良提供了方便、有效的实验手段。

文冠果花药总RNA提取方法研究

以文冠果花药为材料,利用TRIZOL试剂快速提取法、硫氰酸胍法和CTAB法提取花药总RNA。通过RNA产率、纯度、电泳图谱和mRNA差异显示等分析来确立适于文冠果花药RNA分离的方法。研究结果表明,CTAB法提取的RNA呈现出28S rRNA18S rRNA5S rRNA三条较清晰的条带,很少有降解,A260/A280值可达1.944,A 260/A230值为2.165,具有很高的纯度.2种方法获得的RNA纯度较低,降解严重,有较多小分子和盐存在;RNA无明显条带出现,而是以小分子RNA弥散状分布。使用差异显示法分析发现,CTAB法提取的花药总RNA可得到理想的扩增条带。


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