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必赢国际官网一步法适用于微藻总RNA的提取

点击:25 更新时间:2018-10-24 14:30:38


     

以绿色巴夫藻(Pavlova viridis)为实验材料,在比较了Trizol试剂法和必赢国际官网一步法这两种常用RNA提取方法的基础上,建立了一种十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)和酸酚相结合的改良的CTAB-酸酚法。此方法利用高浓度的β-巯基乙醇来防止RNA提取过程中多酚的氧化,然后利用CTAB并结合乙醇和醋酸钾同时使用的方法来有效去除多糖类物质对RNA的干扰。经琼脂糖凝胶电泳检测,所提取的总RNA28S18S条带清晰明亮,无降解;A260 nm/A280 nm值为1.968;200~300 nm全波长紫外扫描无多糖和蛋白吸收峰,表明提取的总RNA质量较好。对提取的总RNA直接进行反转录聚合酶链式反应(reverse tran-scription-polymerase chain reaction,RT-RCR),能够清楚地获得目的基因的cDNA片段,进一步证实了改良的CTAB-酸酚法是一种高质量提取微藻总RNA的有效方法。


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